Desarrollo de un ensayo de formación de foco para identificar partículas virales infectantes de virus ZIKA / (Record no. 32805)
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| 000 -CABECERA | |
|---|---|
| campo de control de longitud fija | 00131nam a22000617a 4500 |
| 005 - FECHA Y HORA DE ACTUALIZACIÓN | |
| 005 | 20230127084659.0 |
| 008 - LONGITUD FIJA | |
| campo de control de longitud fija | 140202s2022 ck ||||| |||| 00| 0 spa d |
| 040 ## - FUENTE DE CATALOGACIÓN | |
| Centro catalogador/agencia de origen | CO-NeUS |
| Lengua de catalogación | español |
| Normas de descripción | rda |
| 041 ## - IDIOMA | |
| Código de lengua del texto/banda sonora o título independiente | español |
| 245 ## - TÍTULO PROPIAMENTE DICHO | |
| título | Desarrollo de un ensayo de formación de foco para identificar partículas virales infectantes de virus ZIKA / |
| Mención de responsabilidad, etc. | Sara Bolívar Marín José , Ricardo Pucciny Cortés |
| 264 ## - PIE DE IMPRENTA | |
| lugar (ciudad) | Neiva : |
| editorial | Universidad Surcolombiana , |
| fecha | 2022 |
| 300 ## - DESCRIPCIÓN FÍSICA | |
| Extensión | 66 páginas : |
| Ilustraciones | figuras ; |
| Dimensiones | 13x13cm. |
| 336 ## - TIPO DE CONTENIDO | |
| Content type term | texto |
| 337 ## - MEDIACIÓN | |
| RDA | rdamedia |
| Content type term | computadora |
| 338 ## - PORTADOR | |
| RDA | rdacarrier |
| Content type term | disco de la computadora |
| 347 ## - Características del archivo digital (R) | |
| RDA | rda |
| 502 ## - NOTA DE TESIS | |
| Nota de tesis | Trabajo de grado (Médicos) -- Universidad Surcolombiana. Facultad de Salud, Programa de Medicina, 2022 |
| 505 ## - NOTA DE CONTENIDO | |
| Nota de contenido | Introducción -- Justificación -- Planteamiento del problema -- Antecedentes -- Objetivos -- Objetivo general -- Objetivos específicos -- Marco teórico -- Flavivirus -- Zika virus -- Celulas Vero -- Cultivo celular -- Ensayo de formación de placas -- Ensayos de formación de focos -- Oeracionalización de las variables -- Diseño metodológico -- Tipo de estudio -- Lugar -- Población -- Muestra -- Estrategias para evitar sesgos -- Técnicas y procedimientos para la recolección de datos -- Preparar equipos y reactivos (Día 0) -- Descongelamiento e incubación línea celular vero 76 (Día 0) -- Siembra de células vero 76 del t-75 a placa de 96 pozos (Dia 1) -- Instrumento para la recolección de información -- Prueba piloto -- Codificación y tabulación -- Fuentes de información -- Plan de análisis de los resultados -- Consideraciones éticas -- Resultados -- Discusión -- Conclusión -- Recomendaciones -- Referencias bibliográficas -- Anexos |
| 520 ## - RESUMEN | |
| Resumen | Introducción: El virus del Zika (ZIKV) codifica una única proteína que posteriormente se procesa en tres proteínas estructurales y siete proteínas no estructurales, de las ultimas la NS1 es la proteína que más se secreta al espacio vascular y sirve como marcador de infección viral. Luego de los brotes de 2013 y 2015 el ZIKV por su relación con microcefalia, síndrome de Guillain-Barré (SGB) y mielitis aguda es declarado por la OMS como una emergencia de salud pública. Por esto, aumentaron el número de investigaciones y se vio la necesidad de conocer el número de partículas infectantes de los stocks usados en diversos experimentos, para lo cual se utilizan diversas técnicas de laboratorio, en nuestro caso se va a utilizar el ensayo de formación de foco, método que utiliza una monocapa de celulas que posterior a la infección viral se fijan y marcan con anticuerpos específicos contra las proteínas virales, para luego ser teñidos y contados. Objetivo: Desarrollar un ensayo de formación de foco para identificar partículas virales infectantes de Zika Materiales y métodos: Se cultivaron celulas vero-76 en placa de 96 pozos con medio completo, las celulas fueron infectadas con ZIKV-PR y/o U, fijadas y permeabilizadas con metanol absoluto a -70°C, se agregó el anticuerpo primario, posteriormente el anticuerpo secundario acoplado a biotina, la estreptavidina- peroxidasa y el cromógeno 3-amino9-etilcarbazol, para posteriormente detener la reacción con agua destilada y contar en microscopio de luz invertido. Se evaluó la confluencia de la monocapa y el tiempo de incubación de infección del virus, probándose de 6, 12, 24 y 48 horas, el anticuerpo monoclonal primario se probó el MAb 644 y 130 a diferentes concentraciones (0.3 µg/mL, 0.5 µg/mL,1 µg/mL y 2 µg/mL) y por último la respuesta al inhibidor de la secreción celular brefeldin A. Resultados: Las celulas infectadas por ZIKV se lograron identificar en monocapa de celulas Vero 76 cultivadas en placa de 96 pozos hasta confluencia del 70%, al momento de la infección con el virus, para lograr confluencia del 100% a las 24h de incubación viral, tiempo propicio para contar los focos de células e impedir la formación de cúmulos de células infectadas. El anticuerpo monoclonal primario más apropiado para el ensayo es MAb 644 a 0.5 µg/mL. Ni el uso de concentraciones ≥ 0.5 µg/mL de anticuerpo primario, ni de Brefeldin A mejoró el conteo de las células infectadas. El número de focos contados por ml en nuestro Stock es a dilución de 10-3 5,08 log 10 Conclusiones: Desarrollamos un protocolo para cuantificar partículas infectantes de ZIKV usando células Vero-76. El ZIKV ahora puede estudiarse en nuestra región utilizando modelos de cultivo celular |
| 700 1# - COAUTOR PERSONAL | |
| 9 (RLIN) | 153419 |
| Nombre de persona | Pucciny Cortés , José Ricardo |
| Término indicativo de función/relación | autor |
| 700 1# - COAUTOR PERSONAL | |
| 9 (RLIN) | 35660 |
| Nombre de persona | Castro Betancourth, Dolly |
| Títulos y otros términos asociados al nombre | Enfermera, magíster en salud pública y Epidemiología |
| Término indicativo de función/relación | Asesor de tesis |
| 700 1# - COAUTOR PERSONAL | |
| 9 (RLIN) | 135331 |
| Nombre de persona | Cortes Guzmán, José Santiago |
| Término indicativo de función/relación | Asesor de tesis |
| 082 04 - CLASIFICACIÓN DECIMAL DEWEY | |
| Clasificación | Th MD 8353010564 / B689d |
| 650 #0 - MATERIA GENERAL | |
| 9 (RLIN) | 146257 |
| Término de materia o nombre geográfico como elemento inicial | Arbovirus |
| 650 #0 - MATERIA GENERAL | |
| 9 (RLIN) | 134688 |
| Término de materia o nombre geográfico como elemento inicial | Virus dengue (VD) |
| 650 #0 - MATERIA GENERAL | |
| 9 (RLIN) | 141805 |
| Término de materia o nombre geográfico como elemento inicial | Virus Zika |
| 650 #0 - MATERIA GENERAL | |
| 9 (RLIN) | 153420 |
| Término de materia o nombre geográfico como elemento inicial | Unidad formadora de foco |
| 942 ## - PUNTO DE ACCESO ADICIONAL KOHA | |
| Fuente del sistema de clasificación o colocación | |
| Tipo de ítem Koha | e-Tesis |
| Parte de la signatura que corresponde a la clasificación (Parte de la clasificación) | Th MD 8353010564 / B689d |
| 990 ## - EQUIVALENCIA O REFERENCIA-CRUZADA [LOCAL, CANADÁ] | |
| Enlace de información para campos 9XX | Vacios |
| Ocultar en el OPAC | Perdido | Esquema de clasificación | No circula | Colección | Sede propietaria | Localización actual | Adquirido | Signatura topográfica | Código de barras | Visto por última vez | Ejemplar | Tipo de ítem | Nota pública |
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| En Colección | Tesis y Trabajos de Grado | Biblioteca Ciencias de la Salud | Biblioteca Ciencias de la Salud | 2022-02-22 | Th MD 8353010564 / B689d | 8310002264 | 2023-01-27 | ej.1 | e-Tesis | Sala | |||
| En Colección | Tesis y Trabajos de Grado | Biblioteca Ciencias de la Salud | Biblioteca Ciencias de la Salud | 2022-02-22 | Th MD 8353010564 / B689d | 8310002265 | 2023-01-27 | Ej.2 | e-Tesis | Sala |