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Plaquetas Humanas Como Modelo Fisiopatológico y de Desenlace Clínico de DENGUE Pediátrico / Johnatan Lozano Culma

By: Lozano Culma,Johnatan [autor].
Contributor(s): Narvaez Rojas, Carlos Fernando Médico., PhD. Inmunología [Asesor de tesis] | Salgado García de Panqueba, Doris Martha Cecilia Pediatra con énfasis en enfermedades infecciosas [Asesor de tesis].
Neiva : Universidad Surcolombiana , 2026Description: 84 páginas : figuras , tablas ; 14cm.Content type: texto Media type: computadora Carrier type: disco de la computadoraSubject(s): Dengue | Progresión de la enfermedad | Plaquetas | Dengue graveDDC classification: Th EP 8363120085 /
Contents:
Justificación -- Planteamiento del Problema -- Pregunta de Investigación -- Marco Teórico -- Dengue -- La infección por Orthoflavivirus -- Los Orthoflavivirus y las plaquetas -- Epidemiologia -- Papel de la plaqueta en la severidad del dengue -- Trombocitopenia en la infección por dengue -- Mecanismos de la trombocitopenia en la infección por dengue -- La infección por virus del dengue y la reducción de la producción de plaquetas -- El dengue aumenta la activación y la depuración plaquetaria -- Manifestaciones Clínicas y de Laboratorio -- Clasificación según la gravedad -- Enfoque diagnóstico -- Diagnóstico específico -- Tratamiento -- Atención de Soporte -- Vacunación en Dengue -- Objetivos -- Objetivo General -- Objetivos específicos -- Metodología Propuesta -- Tipo de estudio -- Período de Estudio -- Población y muestra -- Criterios de Inclusión -- Criterios de exclusión -- Procedimiento -- Confirmación de la infección -- Análisis de fenotipo, activación y funcionalidad plaquetaria -- Estimulación de plaquetas periféricas con phorbol 12-myristate 13-acetate (PMA) -- Aislamiento de plaquetas en sangre periférica -- Análisis de viabilidad -- Detección de proteína NS1 y RNA viral en plaquetas purificadas -- Detección de NS1 por ELISA -- Detección de RNA viral por RT-PCR -- Variables -- Análisis estadístico -- Control de Sesgos -- Consideraciones Éticas -- Código de NÜREMBERG -- Resolución 8430 de 1993 -- Alcance -- Riesgo -- Seguridad de la información -- Declaración Del Helsinki -- Costo y Beneficio -- Para las Instituciones Participantes -- Beneficio para los Investigadores -- Conflicto de Interés -- Resultados -- Caracterización Clínica de la Cohorte Pediátrica -- Características de laboratorio -- Análisis de la Activación Plaquetaria por Citometría de Flujo -- Relación de la activación plaquetaria y la gravedad clínica -- NS1 asociada a plaquetas induce activación celular y trombocitopenia -- Discusión -- Conclusiones -- Referencias Bibliográficas -- Anexos
Dissertation note: Esta trabajo de investigación se encuentra ubicada en la oficina de trabajos de grado, Biblioteca Facultad de salud. Especialista en Pediatría Universidad Surcolombiana. Facultad de Salud,Especialización en Pediatría 2026 Summary: Antecedentes. El dengue es la arbovirosis de mayor impacto mundial y, en Colombia, presenta ciclos epidémicos recientes con alta carga en departamentos como el Huila. Una característica distintiva de la infección por virus del dengue (DENV) es la trombocitopenia acompañada de alteración funcional plaquetaria; sin embargo, los mecanismos que vinculan la interacción virus–plaqueta con la severidad clínica en población pediátrica no están completamente dilucidados. Objetivo. Determinar el efecto del DENV sobre las plaquetas de niños naturalmente infectados y evaluar su asociación con la gravedad clínica. Métodos. Estudio longitudinal, analítico y observacional en 65 niños (1–14 años) con dengue confirmado atendidos en el Hospital Universitario Hernando Moncaleano Perdomo de Neiva y de estos, 10 niños en fase de convalecencia entre marzo de 2023 y junio de 2024. Se aisló y purificó la fracción plaquetaria o se evaluaron las plaquetas en sangre total para: (1) la detección de NS1 por ELISA y de RNA viral por RT-qPCR; (2) el análisis fenotípico y funcional por citometría de flujo (marcadores CD62P, CD107α, CD40L) en condiciones basales y tras estimulación ex vivo. La antigenemia y la viremia también se evaluaron en plasma. En una fracción de pacientes, los resultados se compararon entre las fases aguda y convaleciente y se correlacionaron con parámetros clínicos y el recuento plaquetario. Resultados. En fase aguda, las plaquetas mostraron un aumento de marcadores de activación (CD62P, CD107α, CD40L) y una menor capacidad de respuesta tras la estimulación ex vivo, hallazgo que se normalizó en convalecencia, compatible con un estado de agotamiento funcional durante la fase aguda. La presencia de la proteína viral NS1 en las plaquetas se asoció significativamente con una mayor activación plaquetaria; en contraste, la detección de RNA viral en las plaquetas no se correlacionó con el patrón de activación. La carga de NS1 plaquetaria se correlacionó moderadamente con recuentos plaquetarios bajos, lo que sugiere un papel de NS1 en el consumo/”clearance” plaquetario. No se observaron diferencias claras en la activación basal al estratificar según la severidad clínica. Conclusión. En niños con dengue, la proteína viral NS1 asociada a las plaquetas parece ser un determinante clave de la activación y del posible consumo plaquetario, mientras que la presencia de RNA viral no explica la activación observada. El hallazgo de activación simultánea al agotamiento funcional ofrece un marco fisiopatológico que contribuye a la trombocitopenia y podría orientar estrategias terapéuticas dirigidas a NS1 o a la preservación de la función plaquetaria.
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Item type Current location Collection Call number Copy number Status Notes Date due Barcode Item holds
e-Tesis e-Tesis Biblioteca Ciencias de la Salud
Tesis y Trabajos de Grado Th EP 8363120085 / L925p (Browse shelf) Ej.1 Available sala 8310002730
e-Tesis e-Tesis Biblioteca Ciencias de la Salud
Tesis y Trabajos de Grado Th EP 8363120085 / L925p (Browse shelf) Ej.2 Available sala 8310002731
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Esta trabajo de investigación se encuentra ubicada en la oficina de trabajos de grado, Biblioteca Facultad de salud. Especialista en Pediatría Universidad Surcolombiana. Facultad de Salud,Especialización en Pediatría 2026

Justificación -- Planteamiento del Problema -- Pregunta de Investigación -- Marco Teórico -- Dengue -- La infección por Orthoflavivirus -- Los Orthoflavivirus y las plaquetas -- Epidemiologia -- Papel de la plaqueta en la severidad del dengue -- Trombocitopenia en la infección por dengue -- Mecanismos de la trombocitopenia en la infección por dengue -- La infección por virus del dengue y la reducción de la producción de plaquetas -- El dengue aumenta la activación y la depuración plaquetaria -- Manifestaciones Clínicas y de Laboratorio -- Clasificación según la gravedad -- Enfoque diagnóstico -- Diagnóstico específico -- Tratamiento -- Atención de Soporte -- Vacunación en Dengue -- Objetivos -- Objetivo General -- Objetivos específicos -- Metodología Propuesta -- Tipo de estudio -- Período de Estudio -- Población y muestra -- Criterios de Inclusión -- Criterios de exclusión -- Procedimiento -- Confirmación de la infección -- Análisis de fenotipo, activación y funcionalidad plaquetaria -- Estimulación de plaquetas periféricas con phorbol 12-myristate 13-acetate (PMA) -- Aislamiento de plaquetas en sangre periférica -- Análisis de viabilidad -- Detección de proteína NS1 y RNA viral en plaquetas purificadas -- Detección de NS1 por ELISA -- Detección de RNA viral por RT-PCR -- Variables -- Análisis estadístico -- Control de Sesgos -- Consideraciones Éticas -- Código de NÜREMBERG -- Resolución 8430 de 1993 -- Alcance -- Riesgo -- Seguridad de la información -- Declaración Del Helsinki -- Costo y Beneficio -- Para las Instituciones Participantes -- Beneficio para los Investigadores -- Conflicto de Interés -- Resultados -- Caracterización Clínica de la Cohorte Pediátrica -- Características de laboratorio -- Análisis de la Activación Plaquetaria por Citometría de Flujo -- Relación de la activación plaquetaria y la gravedad clínica -- NS1 asociada a plaquetas induce activación celular y trombocitopenia -- Discusión -- Conclusiones -- Referencias Bibliográficas -- Anexos

Antecedentes. El dengue es la arbovirosis de mayor impacto mundial y, en Colombia, presenta ciclos epidémicos recientes con alta carga en departamentos como el Huila. Una característica distintiva de la infección por virus del dengue (DENV) es la trombocitopenia acompañada de alteración funcional plaquetaria; sin embargo, los mecanismos que vinculan la interacción virus–plaqueta con la severidad clínica en población pediátrica no están completamente dilucidados.
Objetivo. Determinar el efecto del DENV sobre las plaquetas de niños naturalmente infectados y evaluar su asociación con la gravedad clínica.
Métodos. Estudio longitudinal, analítico y observacional en 65 niños (1–14 años) con dengue confirmado atendidos en el Hospital Universitario Hernando Moncaleano Perdomo de Neiva y de estos, 10 niños en fase de convalecencia entre marzo de 2023 y junio de 2024. Se aisló y purificó la fracción plaquetaria o se evaluaron las plaquetas en sangre total para: (1) la detección de NS1 por ELISA y de RNA viral por RT-qPCR; (2) el análisis fenotípico y funcional por citometría de flujo (marcadores CD62P, CD107α, CD40L) en condiciones basales y tras estimulación ex vivo. La antigenemia y la viremia también se evaluaron en plasma. En una fracción de pacientes, los resultados se compararon entre las fases aguda y convaleciente y se correlacionaron con parámetros clínicos y el recuento plaquetario.
Resultados. En fase aguda, las plaquetas mostraron un aumento de marcadores de activación (CD62P, CD107α, CD40L) y una menor capacidad de respuesta tras la estimulación ex vivo, hallazgo que se normalizó en convalecencia, compatible con un estado de agotamiento funcional durante la fase aguda. La presencia de la proteína viral NS1 en las plaquetas se asoció significativamente con una mayor activación plaquetaria; en contraste, la detección de RNA viral en las plaquetas no se correlacionó con el patrón de activación. La carga de NS1 plaquetaria se correlacionó moderadamente con recuentos plaquetarios bajos, lo que sugiere un papel de NS1 en el consumo/”clearance” plaquetario. No se observaron diferencias claras en la activación basal al estratificar según la severidad clínica.
Conclusión. En niños con dengue, la proteína viral NS1 asociada a las plaquetas parece ser un determinante clave de la activación y del posible consumo plaquetario, mientras que la presencia de RNA viral no explica la activación observada. El hallazgo de activación simultánea al agotamiento funcional ofrece un marco fisiopatológico que contribuye a la trombocitopenia y podría orientar estrategias terapéuticas dirigidas a NS1 o a la preservación de la función plaquetaria.

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